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Product Center動物哮喘模型:是達為科生物較為成熟的動物模型之一,由動物平臺經驗豐富的實驗員操作完成。
過敏性哮喘動物模型實驗服務介紹:
BALB/c小鼠于第0天和第14天分別腹腔注射OVA液和DBP溶液,第21~23天連續3天以OVA溶液霧化激發,每天于上午下午固定時間霧化2次,每次20min。霧化過程中觀察小鼠一般行為變化,后一次霧化結束后24小時,小鼠摘眼球取血,取支氣管肺泡灌洗液及肺組織。
一般行為學觀察 觀察小鼠在霧化過程中是否出現撓臉、毛發豎立、呼吸急促、煩躁不安、大小便失禁等現象。
血中Eos計數 后一次霧化激發結束24h后,小鼠摘眼球取血,獲得血液后立即取出20 μl與380μl 嗜酸性粒細胞稀釋液混勻,利用細胞計數板于光學 顯微鏡下進行Eos計數。
血清中IgE測定 將獲得的血液靜置2h后,離心,3500 rpm,15min,取血清,按IgE ELISA試劑盒說明書進行測定,并通過樣本總蛋白含量進行結果校正。
BALF細胞分類計數 將小鼠仰臥位固定,打開胸腔后,結扎右肺及左側肺上葉。分離并暴露氣管,用適宜針頭進行插管,以預冷PBS反復灌洗肺組織(0.5 mL/次,共兩次),收集BALF,低溫離心( 3500 rpm,10min ),取上清,保存于-20℃待測。細胞沉淀用0.2 mL預冷PBS重懸,吹打均勻后取10 μl于細胞計數板上在光學顯微鏡下計細胞總數,剩余細胞懸液涂片,用快速瑞姬氏染液染色,顯微鏡下進行細胞分類計數。
BALF中IL-4、IL-5、IL-9、IL-13、IFN-γ的測定 將獲得的BALF上清根據相關細胞因子檢測試劑盒的說明書進行各指標定量檢測,測定結果經總蛋白含量校正。
肺組織中IL-4和IFN-γ的測定 將右側肺組織用預冷的PBS研磨得15 % 組織勻漿,低溫離心,3500 rpm,15min,取上清按照 ELISA 測定試劑盒的操作步驟進行IL-4和IFN-γ測定,并通過樣本總蛋白定量來進行校正。
肺組織HE及PAS染色 剪取左肺上葉,置10%中性福爾馬林中固定,石蠟包埋,常規石蠟包埋,切片,HE及PAS染色,鏡下觀察肺組織炎性細胞浸潤及黏性蛋白增生情況。
分子實驗平臺:高效運作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術、分子克隆與質粒構建、流式細胞儀檢測、免疫共沉淀、染色質免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實驗、酶聯免疫吸附測定、外泌體抽提及鑒定等實驗。
基因組學平臺:可以完成甲基化檢測、基因芯片分析、高通量測序等實驗。
蛋白組學平臺:能實現LC-MS、ITRAQ、蛋白質修飾分析等重點實驗項目。
病理學平臺:涉及免疫熒光染色、免疫組織化學染色、HE染色、特殊染色等實驗。
臨床前CRO服務:主要提供呼吸系統、神經系統、免疫系統性疾病的藥效學評價服務,包括靶點驗證、體內外模型的構建、藥物篩選、藥物分析、藥效性評價、藥代
動力學和藥理學研究以及院內制劑研發等。
項目轉化服務:助力客戶進行方案設計、聯合課題申報、藥物項目引進和孵化,解決客戶對實驗技術平臺、專業人和融資的需求。