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上海普通電泳PCR 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction,PCR)又稱無(wú)細(xì)胞分子克隆或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴(kuò)增技術(shù)。是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個(gè)周期循環(huán)進(jìn)行,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增,具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、省時(shí)等特點(diǎn)。
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實(shí)驗(yàn)介紹:
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction,PCR)又稱無(wú)細(xì)胞分子克隆或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴(kuò)增技術(shù)。是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個(gè)周期循環(huán)進(jìn)行,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增,具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、省時(shí)等特點(diǎn)。
上海普通電泳PCR
實(shí)驗(yàn)流程:
制備模板、引物設(shè)計(jì)→PCR→核酸電泳→結(jié)果分析→提交實(shí)驗(yàn)結(jié)果
客戶方需提供:
新鮮的血液、組織、細(xì)胞樣本或已制備好的符合實(shí)驗(yàn)要求的PCR模板,如純化好的基因組DNA或cDNA,引物或目標(biāo)基因序列信息。
實(shí)驗(yàn)周期:
1-2周
提供結(jié)果:
可提供引物序列及PCR產(chǎn)物核酸電泳圖片及實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
普通逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR):
RT-PCR稱為反轉(zhuǎn)錄PCR,實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。