技術(shù)文章
Technical articles低溫冷凍腦損傷模型是一種類似于人腦挫傷的動物模型,主要為血管源性腦水腫,是常用的顱腦損傷實(shí)驗(yàn)?zāi)P汀T撃P途唧w制作方法:手術(shù)前大鼠禁食l晚,不禁水。動物稱重后,麻醉成功后,動物頭部固定于江灣Ⅰ型C立體定向儀上,頭部備皮,安爾碘消毒后,于中線切開頭皮,剝離骨膜,在冠狀縫后、人字縫前、矢狀縫右側(cè)顯微手術(shù)電鉆顱骨鉆孔。骨窗直徑為5mm,用于致傷和行顱內(nèi)壓監(jiān)測。將自制冷凍杯置入液氮中1min預(yù)冷,盛入液氮后迅速從液氮罐中取出,立即蓋上杯蓋,用冷凍杯底部與硬腦膜充分接觸15s,冷凍處硬腦膜和鄰近顱骨由白色恢復(fù)至周圍組織同樣顏色的時(shí)間一般為8~10s,表示冷凍良好。正常對照組動物不做麻醉和手術(shù)處理;假凍傷組與凍傷組同樣行麻醉和開顱手術(shù),但不冷凍,以盛有37℃生理鹽水的冷凍杯與硬腦膜充分接觸15s行假冷凍。
術(shù)后進(jìn)行顱內(nèi)壓的測定:假凍傷組和凍傷組各取6只動物,在上述操作結(jié)束后立即監(jiān)測顱內(nèi)壓。將ALC-MPA型多道生物信號分析系統(tǒng)的顱內(nèi)壓探頭由骨窗處向前方放置于顱骨下硬腦膜外,然后將硬腦膜及骨窗周圍顱骨外板和軟組織用無菌棉球拭干,用醫(yī)用耳腦膠封閉顱骨與硬腦膜之間的縫隙,骨瓣復(fù)位。骨窗邊緣的顱骨外板上鉆一直徑約1mm微孔,固定小螺絲釘1枚,后用自凝牙托水泥封閉骨窗,在此過程中,務(wù)必做到嚴(yán)密封閉。顱內(nèi)壓持續(xù)監(jiān)測6h,每間隔1h取2min的平均值作為測得值記錄,并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。