技術(shù)文章
Technical articles(1)復(fù)制方法 供體組大鼠體重150~180g,受體組大鼠體重220~250g,按40mg/kg體重的劑量經(jīng)腹腔注射戊丨巴丨比丨妥丨鈉麻醉,麻醉后動(dòng)物仰臥固定于手術(shù)板上,常規(guī)消毒腹部手術(shù)區(qū)域并去毛。供體大鼠手術(shù):作肋弓下1.0cm橫行切口人腹,經(jīng)門靜脈內(nèi)注入肝素鈉250U。切開膈肌,沿胸廓兩側(cè)向上翻起。游離升主動(dòng)脈至降主動(dòng)脈并分離主動(dòng)脈弓上3條分支,結(jié)扎兩側(cè)頸總動(dòng)脈及弓下血管分支,在兩側(cè)鎖骨下動(dòng)脈分叉點(diǎn)處結(jié)扎切斷。于主動(dòng)脈瓣遠(yuǎn)端結(jié)扎升主動(dòng)脈,向遠(yuǎn)端灌注乳酸林格氏液10ml,切斷升主動(dòng)脈近端及降主動(dòng)脈遠(yuǎn)端,于右房遠(yuǎn)端切斷前腔靜脈,并于無名靜脈分叉處切斷無名靜脈,將胸腺連同主動(dòng)脈、兩側(cè)鎖骨下動(dòng)脈、前腔靜脈、無名靜脈及其與胸腺之間的結(jié)締組織整塊切取,放入4℃乳酸林格氏液中修整,結(jié)扎升主動(dòng)脈端及兩側(cè)無名靜脈遠(yuǎn)端,建立完整的血運(yùn)通路。受體大鼠手術(shù):作右頸前區(qū)縱行切口,游離暴露右頸外靜脈和右頸總動(dòng)脈,以血管夾夾閉兩條血管近心端,遠(yuǎn)心端在血管分叉處結(jié)扎切斷。將游離血管穿入自制套管中,并將斷端外翻套在套管外,結(jié)扎固定。將修整完畢的供體降主動(dòng)脈和前腔靜脈分別套在受體右頸總動(dòng)脈和右頸外靜脈套管外,排氣后放開血管夾,結(jié)扎固定,如有分支血管出血,應(yīng)逐一結(jié)扎,固定移植物。術(shù)后連續(xù)7d,按10mg/kg體重劑量靜脈注射環(huán)孢素A以防感染。
(2)模型特點(diǎn) 采用本方法復(fù)制的帶血管胸腺移植模型動(dòng)物存活率高,供體胸腺切取經(jīng)灌洗后變?yōu)槿榘咨匦陆油ㄑ芎笮叵僮優(yōu)榉奂t色,重建動(dòng)脈搏動(dòng)良好,胸腺無腫脹。術(shù)后4周取模型大鼠胸腺標(biāo)本時(shí)移植胸腺無明顯縮小,光鏡下胸腺組織切片觀察見胸腺組織結(jié)構(gòu)基本正常,未見明顯排斥現(xiàn)象。本模型以主動(dòng)脈作為移植胸腺的供血血管,在進(jìn)行動(dòng)、靜脈吻合時(shí),采用了套管技術(shù),大大縮短了血管吻合時(shí)間和溫缺血時(shí)間,對受體動(dòng)物打擊小,同時(shí)也明顯降低了手術(shù)操作難度。因此,本方法復(fù)制的帶血管胸腺移植大鼠模型與以往胸腺移植模型相比,具有動(dòng)物成活率高,操作簡便,排斥反應(yīng)小等優(yōu)點(diǎn)。
(3)比較醫(yī)學(xué) 到目前為止,帶血管胸腺移植手術(shù)已用于惡性腫瘤以及重癥肌無力患者的臨床治療。為獲得令人滿意的治療效果,進(jìn)一步拓展帶血管胸腺移植手術(shù)的治療范圍,選擇和建立合適的帶血管胸腺移植動(dòng)物模型非常重要。近年來,帶血管胸腺移植動(dòng)物模型在國內(nèi)外均有研究報(bào)道,這些研究主要應(yīng)用大鼠、小鼠、小型豬等進(jìn)行了帶血管的胸腺移植,但是移植物均采用胸腺的一個(gè)葉,胸腺功能未能得到充分發(fā)揮。與以往單葉胸腺移植動(dòng)物模型相比,本方法建立的帶血管胸腺移植動(dòng)物模型采用的移植物為整體胸腺,它有利于發(fā)揮移植胸腺的功能,是胸腺移植較為好的動(dòng)物模型。