技術(shù)文章
Technical articles(1)復(fù)制方法 將D-半乳糖用生理鹽水配制成50%注射液,常規(guī)滅菌后待用;復(fù)方托品酰胺滴眼劑供鏡檢前擴瞳用。用3周齡體重25g左右大鼠,經(jīng)復(fù)方托品酰胺滴眼劑散瞳后,裂隙燈檢查晶狀體透明。造模大鼠均采用常規(guī)消毒,然后于頸背部每日經(jīng)皮下按30ml/kg體重的劑量注射50%半乳糖,每天1次,連續(xù)30d。于次注射后第7, 14, 21, 30日分別以復(fù)方托品酰胺滴眼劑散瞳后用裂隙燈觀察晶狀體的動態(tài)變化。
(2)模型特點 注射D-半乳糖7d后,大鼠開始出現(xiàn)白內(nèi)障早期改變,即晶狀體周邊皮質(zhì)出現(xiàn)空泡;給藥14d、21d及30d后大鼠均出現(xiàn)不同程度的晶狀體渾濁。經(jīng)皮下注射 D-半乳糖建立的白內(nèi)障動物模型復(fù)制成功率高,模型復(fù)制成功率高,造模時間較短,實驗操作簡單,實驗經(jīng)費耗費較少,本模型為進一步研究白內(nèi)障發(fā)病機制、療效觀察以及相關(guān)藥物的篩選提供了較為理想的實驗平臺。
(3)比較醫(yī)學(xué) 應(yīng)用D-半乳糖誘導(dǎo)而復(fù)制的白內(nèi)障動物模型,其白內(nèi)障形成的病理過程與臨床上人類糖尿病性白內(nèi)障和老年性白內(nèi)障相似,是目前得到*的一種較為理想的動物模型,已廣泛應(yīng)用于糖尿病性白內(nèi)障、老年性白內(nèi)障的發(fā)病機制及藥物治療方面的研究。但采用本方法制作的動物模型對大鼠年齡、半乳糖誘導(dǎo)途徑、半乳糖的使用劑量要求較高。除了采用皮下注射方法外,也有研究采用在建立半乳糖性白內(nèi)障模型過程中,用含半乳糖膳食喂養(yǎng)動物或給予動物飲糖水來復(fù)制動物模型,但此方法使大鼠白內(nèi)障病變出現(xiàn)時間延緩,病情減輕,較為符合人類老年性白內(nèi)障的發(fā)病規(guī)律,適用于進行白內(nèi)障藥物治療方面的研究;或者通過動物腹腔注射半乳糖使口服半乳糖誘發(fā)白內(nèi)障病變的成熟時間提早,適用于作白內(nèi)障時混濁晶體測定方面的研究;此外尚有用球后注射半乳糖的方法來制作大鼠晶體混濁,但由于制作技術(shù)難度較高易造成眼部感染等缺陷,實用性較差。目前國內(nèi)文獻半乳糖性白內(nèi)障動物模型大多數(shù)采用腹腔注射方法,但研究發(fā)現(xiàn)腹腔注射D-半乳糖的3周齡幼鼠極易死亡,所以模型復(fù)制的成功率較低。其原因可能為腹腔注射時,注射針的針尖易傷及幼鼠臟器造成大鼠死亡;也可能與腹膜吸收半乳糖較快,使組織細胞處于高滲環(huán)境,引起組織細胞功能障礙從而導(dǎo)致動物死亡。因此,用皮下注射方法造模則可避免或減少動物傷亡,提高模型動物的存活率,模型復(fù)制成功率高。實踐中采用何種大鼠年齡的大鼠、糖劑量及誘導(dǎo)途徑應(yīng)根據(jù)實驗需要而定,因為這些因素將直接關(guān)系到動物模型復(fù)制的成敗及應(yīng)用。